Elektroforese: wat het is, waar het voor is en hoe het wordt gedaan

Inhoud

• Waar is het voor
• Hoe het is gedaan
• Soorten elektroforese
• 1. Hemoglobine-elektroforese
• 2. Eiwitelektroforese

Elektroforese is een laboratoriumtechniek die wordt uitgevoerd met als doel moleculen te scheiden op basis van hun grootte en elektrische lading, zodat de diagnose van ziekten kan worden gesteld, eiwitexpressie kan worden geverifieerd of micro-organismen kunnen worden geïdentificeerd.

Elektroforese is een eenvoudige en goedkope procedure die wordt gebruikt in laboratoriumroutine en in onderzoeksprojecten. Volgens het doel van elektroforese kan het nodig zijn om bijvoorbeeld andere tests en onderzoeken uit te voeren om een ​​diagnose te stellen.

Waar is het voor

Elektroforese kan voor verschillende doeleinden worden uitgevoerd, zowel in onderzoeksprojecten als bij diagnose, aangezien het een eenvoudige en goedkope techniek is.Zo kan elektroforese worden uitgevoerd om:

• Identificeer virussen, schimmels, bacteriën en parasieten, waarbij deze toepassing vaker voorkomt in onderzoeksprojecten;
• Vaderschapstest;
• Controleer de expressie van eiwitten;
• Identificeer mutaties, die bijvoorbeeld nuttig zijn bij de diagnose van leukemie;
• Analyseer de soorten circulerend hemoglobine, die nuttig zijn bij de diagnose van sikkelcelanemie;
• Beoordeel de hoeveelheid eiwitten die in het bloed aanwezig zijn.

Afhankelijk van het doel van de elektroforese kan het nodig zijn om andere aanvullende tests uit te voeren zodat de arts de diagnose kan voltooien.

Hoe het is gedaan

Om elektroforese uit te voeren, is de gel vereist, die polyacrylamide of agarose kan zijn, afhankelijk van het doel, elektroforesebuffer en vat, molecuulgewichtsmarkering en een fluorescerende kleurstof, naast een UV- of LED-lichtapparatuur, ook bekend als een transilluminator.

Na het bereiden van de gel moet een specifiek object worden geplaatst zodat de putjes in de gel worden gemaakt, in de volksmond de kam genoemd, en laat de gel uitharden. Als de gel klaar is, breng je de stoffen gewoon aan in de putjes. Hiervoor moet een molecuulgewichtsmarkering in een van de putjes worden geplaatst, een positieve controle, dat wil zeggen de stof waarvan bekend is wat het is, een negatieve controle, die de geldigheid van de reactie garandeert, en de te analyseren monsters. Alle monsters moeten worden gemengd met een fluorescerende kleurstof, omdat het op deze manier mogelijk is om de banden op de transilluminator te visualiseren.

De gel met de monsters moet in het elektroforesevat worden geplaatst, dat de specifieke bufferoplossing bevat, en vervolgens wordt het apparaat ingeschakeld zodat er elektrische stroom is en bijgevolg een potentiaalverschil, wat belangrijk is voor de scheidingsdeeltjes volgens hun belasting en grootte. De elektroforetische looptijd is afhankelijk van het doel van de procedure en kan tot 1 uur duren.

Na de aangegeven tijd is het mogelijk om het resultaat van de elektroforetische doorloop door de transilluminator te bekijken. Wanneer de gel onder UV- of LED-licht wordt geplaatst, is het mogelijk om het bandpatroon te visualiseren: hoe groter het molecuul, hoe kleiner de migratie, dichter bij de put, terwijl hoe lichter het molecuul, hoe groter het migratiepotentieel.

Om de reactie te valideren, moeten de banden van de positieve controle worden gevisualiseerd en moet er niets in de negatieve controle worden gevisualiseerd, omdat het anders een indicatie is dat er sprake was van besmetting en het hele proces moet worden herhaald.

Soorten elektroforese

Elektroforese kan voor verschillende doeleinden worden uitgevoerd en afhankelijk van het doel kunnen verschillende soorten gel worden gebruikt, waarvan polyacrylamide en agarose de meest voorkomende zijn.

Elektroforese om micro-organismen te identificeren komt vaker voor in onderzoekslaboratoria, maar voor diagnostische doeleinden kan elektroforese worden gebruikt om hematologische ziekten en ziekten te identificeren die evolueren met de toename van de hoeveelheid eiwitten, wat de belangrijkste soorten elektroforese zijn:

1. Hemoglobine-elektroforese

Hemoglobine-elektroforese is een laboratoriumtechniek die wordt uitgevoerd om de verschillende soorten hemoglobine die in het bloed circuleren te identificeren, waardoor de aanwezigheid van ziekten die verband houden met de hemoglobinesynthese kan worden vastgesteld. Het type hemoglobine wordt geïdentificeerd door middel van elektroforese bij een specifieke pH, idealiter tussen 8,0 en 9,0, met een patroon van banden dat vergelijkbaar is met het normale patroon, waardoor abnormale hemoglobines kunnen worden geïdentificeerd.

Waar het voor is gemaakt: Hemoglobine-elektroforese wordt uitgevoerd voor het onderzoeken en diagnosticeren van ziekten die verband houden met hemoglobinesynthese, zoals sikkelcelanemie en hemoglobine C-ziekte, naast dat het nuttig is bij het differentiëren van thalassemie. Leer hoe u hemoglobine-elektroforese interpreteert.

2. Eiwitelektroforese

Eiwitelektroforese is een onderzoek dat door de arts wordt aangevraagd om de hoeveelheid eiwitten die in het bloed circuleren te beoordelen en zo ziekten te identificeren. Dit onderzoek gebeurt aan de hand van een bloedmonster dat wordt gecentrifugeerd om het plasma te verkrijgen, het deel van het bloed dat onder meer uit eiwitten bestaat.

Na elektroforese kan een patroon van banden worden gevisualiseerd en vervolgens een grafiek waarin de hoeveelheid van elke fractie van eiwitten wordt aangegeven, wat fundamenteel is voor de diagnose.

Waar het voor is gemaakt: Eiwitelektroforese stelt de arts in staat om het optreden van multipel myeloom, uitdroging, cirrose, ontsteking, leverziekte, pancreatitis, lupus en hypertensie te onderzoeken volgens het bandpatroon en de grafiek die in het onderzoeksrapport wordt gepresenteerd.

Begrijp hoe het wordt gedaan en hoe u het resultaat van eiwitelektroforese kunt begrijpen.